IDENTIFICAREA SI VALIDAREA UNOR TINTE MOLECULARE LA NIVELUL CELULELOR STEM TUMORALE GASTRICE PENTRU DEZVOLTAREA UNOR NOI STRATEGII TERAPEUTICE ANTITUMORALE

Program: Resurse Umane
Cod proiect: TE-100/2010
Finantator: UEFISCSU
Durata proiectului: 36 luni (august 2010 – iulie 2013)
Coordonator: Institutul de Virusologie Stefan S. Nicolau (www.virology.ro)
Adresa: Sos. Mihai Bravu nr. 285, sector 3, Bucuresti, Romania; tel/fax: 021 3242590
Director de proiect: Dr. Mihaela CHIVU ECONOMESCU, CSIII
e-mail: mihaela.chivu@gmail.com; mihaela.chivu@virology.ro

Buget: 750.000 lei

Rezumat:
    Heterogenicitatea celulara prezenta in majoritatea tumorilor reprezinta o provocare pentru terapia antitumorala, deoarece strategiile
terapeutice curente tintesc numai celulele care prolifereaza rapid din cadrul tumorii, nereusind sa distruga celule stem tumorale, care sunt mai rezistente la actiunea agentilor chimioterapeutici standard si au abilitatea de a regenera tumora. A devenit astfel tot mai evident ca este necesar sa se dezvolte strategii adresate tintit mecanismelor de supravietuire si regenerare caracteristice celulelor stem tumorale.
    Un studiu recent publicat in 2009, privind posibiliatatea identificarii celulelor stem tumorale gastrice (CSTG) pe baza antigenului de
suprafata CD44, deschide noi directii de abordare terapeutica a carcinomului gastric, afectiune care este a doua cauza de deces la nivel mondial (700000 de decese anual in lume; 17/6.6 M/F decese/100000 de locuitori anual in Romania).
    Avand in vedere posibilitatea de a identifica si izola CSTG, precum si experienta laboratorului nostru in domeniul celulelor stem si a
terapiei antitumorale, ne propunem drept scop utilizarea tehnologiei siRNA pentru a inhiba specific anumite gene supraexprimate in cancerul gastric care prin efectul lor pot fi promotori ai unor procese precum: proliferarea celulara, interactia cu matrixul, motilitate, metastazare, angiogeneza.

BIBLIOGRAFIE:
Al-Hajj M, Wicha M S, et al. Prospective identification of tumorigenic breast cancer cells. Proc Natl Acad Sci USA 2003; 100:3983-3988.
Bonnet D, Dick J E. Human acute myeloid leukemia is organized as a hierarchy that originates from a primitive hematopoietic cell. Nat Med 1997; 3:730-737.
Chen T, Deng C. Inhibitory effect of siRNA targeting survivin in gastric cancer MGC-803 cells. Int Immunopharmacol. 2008;8(7):1006-11.
Hannon GJ, Rossi JJ.  Unlocking the potential of the human genome with RNA interference. Nature 2004; 431: 371–8
Houghton J, Stoicov C, et al. Goldenring JR, Wang TC. Gastric cancer originating from bone marrow-derived cells. Science 2004; 306: 1568–1571.
Quante M, Wang TC. Inflammation and stem cells in gastrointestinal carcinogenesis, Physiology, 2008; 23: 350–359.
Lei XY, Zhong M, et al. Silencing of Bcl-XL expression in human MGC-803 gastric cancer cells by siRNA. Acta Biochim Biophys Sin. 2005; 37(8):555-60.
Li C, Heidt D G, et al. Identification of pancreatic cancer stem cells. Cancer Res 2007; 67:1030-1037.
Pai SI, Lin YY, et al. Prospects of RNA interference therapy for cancer. Gene Ther 2006; 13: 464–77
Parkin DM, Bray F, et al. Global cancer statistics, 2002. CA Cancer J Clin. 2005; 55(2):74-108
Singh S K, Clarke I D, et al. Identification of a cancer stem cell in human brain tumors. Cancer Res 2003; 63:5821-5828.
Singh S K, Hawkins C, et al. Identification of human brain tumour initiating cells. Nature 2004; 432:396-401.
Takaishi S, Okumura T, et al. Identification of gastric cancer stem cells using the cell surface marker CD44. Stem Cells. 2009;27(5):1006-20.
Valean S, Armean P,  et al. Cancer Mortality in Romania, 1955-2004. J Gastrointestin Liver Dis.,  2008;17(1):9-14.
Zhu H, Mitsuhashi N, et al. The role of the hyaluronan receptor CD44 in mesenchymal stem cell migration in the extracellular matrix. Stem Cells. 2006 Apr; 24(4):928-35.
Wang Q, Huang Y, et al. siRNA targeting midkine inhibits gastric cancer cells growth and induces apoptosis involved caspase-3,8,9 activation and mitochondrial depolarization. J Biomed Sci. 2007;14(6):783-95.

Obiectivele proiectului:
1. Identificarea, izolarea si caracterizarea CSTG. Testarea capacitatii tumorale pe modele animale imunodeficiente.
2. Identificarea unor tinte moleculare prin testarea expresiei genice la nivelul CSTG, si selectarea genelor semnificativ modificate.
3. Inhibarea specifica a expresiei genelor selectate cu ajutorul metodologiei siRNA
4. Analiza efectelor induse de terapia moleculara asupra functionalitatii CSTG.

Plan de realizare:
Etapa I (12 august 2010 – 10 decembrie 2010)
Obiectiv: Identificarea, izolarea si caracterizarea celulelor stem tumorale gastrice in linii celulare si culturi primare de adenocarcinom gastric.
Buget: 110.000 lei
Rezultate:
Protocol de selectie a celulelor stem tumorale gastrice.
Studiu de evaluare a performantelor metodei de selectie propuse.
Elaborarea unui articol stiintific acceptat spre publicare intr-o revista ISI (Hepato-Gastroenterology, programat pentru numarul 104)

Etapa II (10 decembrie 2010 – 10 decembrie 2011)
Obiectiv 1: Testarea capacitatii tumorigeneza pe modele animale imunodeficiente.
Obiectiv 2: Identificarea unor tinte moleculare prin testarea expresiei genice la nivelul celulelor stem tumorale gastrice, si selectarea genelor
semnificativ modificate.
Buget: 225.000 lei

Rezultate

Etapa III (11 decembrie 2011 – 5 decembrie 2012)
Obiectiv 1: Inhibarea specifica a expresiei genelor selectate cu ajutorul metodologiei siRNA.
Obiectiv 2: Analiza efectelor induse de terapia moleculara asupra functionalitatii celulelor stem tumorale gastrice in vitro.
Buget: 252.000 lei

Rezultate

Etapa IV (6 decembrie 2012 – 15 iulie 2013)
Obiectiv 1: Analiza efectelor induse de terapia moleculara asupra functionalitatii celulelor stem tumorale gastrice in vivo.
Obiectiv 2: Integrarea rezultatelor si formularea concluziilor finale.
Buget: 148.000 lei

Rezultate

Echipa de lucru:
Dr. Mihaela CHIVU ECONOMESCU, CSIII
Drd. Laura G. NECULA, CS
Drd. Denisa Laura DRAGU, CS
Cosmin Ilie STANCU, AsC

                                                                          Inapoi la pagina anterioara