IDENTIFICAREA SI VALIDAREA UNOR TINTE MOLECULARE LA NIVELUL CELULELOR STEM TUMORALE GASTRICE PENTRU DEZVOLTAREA UNOR NOI STRATEGII TERAPEUTICE ANTITUMORALE
Program: Resurse Umane
Cod proiect: TE-100/2010
Finantator: UEFISCSU
Durata proiectului: 36 luni (august 2010 – iulie 2013)
Coordonator: Institutul de Virusologie Stefan S. Nicolau (www.virology.ro)
Adresa: Sos. Mihai Bravu nr. 285, sector 3, Bucuresti, Romania; tel/fax: 021 3242590
Director de proiect: Dr. Mihaela CHIVU ECONOMESCU, CSIII
e-mail: mihaela.chivu@gmail.com; mihaela.chivu@virology.ro
Etapa III (11.12.2011 – 5.12.2012)
OBIECTIVE SI ACTIVITATI:
Ob 1. Inhibarea specifica a expresiei genelor selectate cu ajutorul metodologiei siRNA.
1.1. Transfectia celulelor stem tumorale gastrice cu siRNA specific genelor tinta.
1.2. Analiza degradarii ARNm specific prin cuantificarea expresiei genice prin tehnica real time PCR.
1.3 Analiza inhibarii sintezei proteinei de interes prin metoda western blot.
Ob 2. Analiza efectelor induse de terapia moleculara asupra functionalitatii celulelor stem tumorale gastrice in vitro.
2.1. Testarea capacitatii proliferative a celulelor obtinute prin metode colorimetrice.
2.2. Analiza evolutiei procesului apoptotic in celulele manipulate genetic prin testul cu Anexina V/PI.
2.3 Testarea invazivitatii in vitro pe baza capacitatii de a degrada componentele matricei extracelulare.
REZULTATELE ETAPEI:
Lucrarile efectuate in cadrul etapei au condus la:
1. Elaborarea unui protocol de inhibare a expresiei genice cu ajutorul siRNA specific pe linii celulare tumorale.
2. Realizarea unui studiu asupra modificarilor functionale induse la nivelul celulelor stem tumorale gastrice in urma terapiei antisens cu siRNA KRT17, S100A2, SALL4.
3. Elaborarea a doua articole stiintifice si publicarea acestora in reviste ISI:
Yamanaka S, Olaru AO, An F, Luvsanjav D, Jina Z, Agarwal R, Tomuleasa C, Popescu I, Alexandrescu S, Dima S, Chivu-Economescu M, Montgomery EA, Torbenson M, Meltzer SJ, Selaru FM. MicroRNA-21 inhibits Serpini1, a gene with novel tumour suppressive effects in gastric cancer. Digestive and Liver Disease 2012, 2012 Jul;44(7):589-96. (ISSN 1590-8658). IF 2.805.
Dima SO, Tanase C, Albulescu R, Herlea V,Chivu-Economescu M, Purnichescu-Purtan R, Dumitrascu T, Duda DG, Popescu I. An exploratory study of inflammatory cytokines as prognostic biomarkers in ductal pancreatic adenocarcinoma patients.Pancreas 2012, 2012; 41: 1001-1007.(ISSN 0885-3177).IF 2.067.
4. Sustinerea a doua comunicari orale cu rezultatele proiectului in cadrul a doua conferinte cu participare internationala:
Mihaela Chivu-Economescu, Laura G. Necula, Coralia Bleotu, Denisa Dragu, Simona O. Dima, Adriana Dumitru, Gabriel Constantinescu, Irinel Popescu, Carmen C. Diaconu, In search of a gastric cancer molecular signature, Simpozionul Academician Nicolae Cajal Symposium, 28-30 March 2012, Bucharest, Romania.
Mihaela Chivu-Economescu, Laura G. Necula, Denisa Dragu, Coralia Bleotu, Lilia Matei, Simona O. Dima, Adriana Dumitru, Gabriel Constantinescu, Irinel Popescu, Carmen C. Diaconu, New insights into the molecular etiology of gastric cancer, Congresul National de Oncologie Medicala si Radioterapie organizat in cooperare cu ESMO, 18-20 octombrie 2012, Sinaia, Hotel International – publicat in Journal of Radiotherapy and Medical Oncology, vol. 18 supliment, 2012, pag. 36